Marquez sempat menghidupkan kembali motornya dan kembali ke pit untuk melakukan perbaikan. Meski demikian, pembalap asal Spanyol tersebut masih mampu memperbaiki catatan waktunya hingga finis di posisi lima besar.
Di sisi lain, Marco Bezzecchi menunjukkan peningkatan signifikan dibanding sesi FP1. Setelah hanya berada di posisi ke-16 pada latihan pagi, pembalap Italia itu bangkit dan sempat memimpin jalannya sesi dengan rekor lap baru sebelum akhirnya dikalahkan oleh Ai Ogura.
Dominasi Aprilia semakin terlihat dengan hadirnya Raul Fernandez di barisan depan. Pembalap Trackhouse Racing tersebut ikut bersaing di kelompok teratas dan memperkuat performa kompetitif motor RS-GP di Brno.
Honda juga mencatat hasil positif melalui Joan Mir dan Diogo Moreira. Keduanya berhasil mengamankan tiket langsung ke Kualifikasi 2 (Q2), meskipun Mir mengalami insiden jatuh pada penghujung sesi latihan.
Sementara itu, Jorge Martin mengalami hari yang kurang ideal. Pembalap Aprilia tersebut gagal menembus 10 besar sehingga harus memulai perjuangannya dari Kualifikasi 1 (Q1) pada Sabtu.
